细胞培养室管理制度 [工程研究中心2014年]
细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室，所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。
一、 总则
1. 细胞培养室主要由中心工作人员使用，不对外开放。
2. 进出细胞室实验需要登记。如有不符合实验室工作和生物安全要求的，实验室负责人和细胞室工作人员有权责令整改。
3. 使用人员需参加专门的细胞培养室使用规范培训并通过考核后，方可获准进入细胞培养室进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞培养室或使用相关设备。
4. 细胞培养室正常使用过程中，人员进出应通过缓冲间和风淋间；进出实验室的器械和样品需通过传递窗，严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入，严禁将与实验无关的物品带入实验室，在细胞培养室内不得进行微生物等其它易污染物的培养，禁止从事任何高危生化实验。
5. 实验人员应爱护实验室各类仪器，按照规则使用并保持设备清洁。实验中的昂贵设备，未经许可不得擅自开关。精密仪器需经专门培训后方能操作未经许可不得改变设备仪器的预设参数。设备仪器出现故障或发生事故，应及时向实验室负责人报告，安排专业人员进行检修。
二、条例
(一) 常规操作
1. 穿着专用实验服。实验人员必须在细胞室缓冲间内更换细胞室专用实验服，严禁不穿实验服或直接穿着普通实验室实验服进入细胞室。
2. 穿着专用拖鞋。在准备间换下自己的鞋子，尽量避免在缓冲间走动、停留。
3. 细胞室最多可6个人同时使用。
4. 实验过程中严禁喧哗，闲聊，反复进出培养室。
(二) 培养箱使用规则
1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。
注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。2. 从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。
3. 培养瓶/袋放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4. 培养箱内细胞培养的放置需整洁有序，方便查找，同时应尽量提高培养箱的使用效率，负责人员可视实验情况启用或停止空培养箱的使用，节约资源。
5. 普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/袋细胞每天只需要观察生长状态一次。忌频繁将细胞拿出观察，避免培养箱造成污染，且影响细胞生长条件的恒定。4. 原代细胞需放置在原代培养专用培养箱培养，不得放置于其他培养箱，如一段时间内无原代细胞实验，负责人可协调安排培养箱供其他细胞培养使用。
5. 实验人员应经常注意检查培养箱温度、CO2气体量是否相符设定值。密切注意培养箱内的增湿盘，定期更换无菌水并进行消毒。密切注意培养箱内情况，如出现霉变、菌斑、支原体和衣原体感染或其他明显染菌迹象，应立即通知管理员及其他使用者。
6. 每周更换培养箱托盘内无菌水。
(三) 显微镜使用规则
1. 倒置相差显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2. 离开细胞室时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。
3. 使用完毕后，在显微镜使用记录本上登记。
(四) 超净台相关操作规则
1. 超净台使用前用紫外灯照射30分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，超净台内严禁堆放过多物品影响风路平衡，不同超净台内物品严禁频繁交换使用。
2. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精液面是否占瓶高1/3-2/3。消毒用75%的酒精，酒精灯用95%以上的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。
3. 超净台中应摆放废液缸，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内加入84片处理片刻，倒入废液池并同时用水冲释。废液缸应及时处理，严禁长时间放置，以免留有大量培养液滋生细菌。固体垃圾分类处理。
4. 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶，离心管，移液管等必须及时带出细胞室。
(五) 冰箱、试剂等相关操作规则
1. 从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。严禁长时间敞开冰箱门。
2. 各人存放于冰箱内的培养液、生化试剂、样品要注明姓名、配制日期、样品名称，特殊试剂需获得细胞室管理人员同意后方能放置。不得使用他人的培养液或其他生化试剂。
3. 细胞室内的冰箱空间有限，尽量仅放置使用频率较高的试剂。请勿将一些闲置试剂，污染试剂长期放置在细胞室。
4. 工作人员会定期对冰箱进行清理，发现无标记，过期试剂等违规物品将全部清除出去，并且查找试剂配置人给予警告。
(六) 进入细胞室物品控制
1. 所有进入细胞室的物品需经过传递窗，尽量经过紫外照射，酒精表面消毒。
2. 严禁将可能含有污染物或病原菌的实验物品带入细胞室。
3. 细胞室内仅放置少量实验必须耗材即可，不得整箱搬入，出现洁净室内物品堆积状况。
4. 细胞室内储物柜的物品放置由相关管理人员安排，并做标记。
(七) 细胞室清洁守则
1. 日常维护：注意培养箱显示正常，显微镜，冰箱，超净台的正常使用与维护。细胞室内以及门口生物样品专用垃圾桶的及时清理。每日紫外消毒细胞室1小时。
2. 每周大清洁：每周五下午五点用84消毒液打扫细胞室。
清洁顺序：用84消毒液擦细胞室及缓冲间地面、桌面，培养箱、超净台以及冰箱外壁，及桌上的仪器，细胞室墙面，传递窗，风淋室；第一更衣室衣柜和拖鞋摆放整齐，拖地。
4. 在没有出现问题的情况下，每2个月清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞可以暂存于另一个培养箱；将培养箱内的不锈钢板取出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁。
